穎泰三號主要成分是枯草芽孢桿菌及產生的枯草菌肽抗菌肽，枯草菌肽由37個氨基酸組成，結構中含有兩個α-螺旋、一個連接環(huán)和兩個二硫鍵。其成分明確，結構清晰，可有效殺滅產氣莢膜梭菌、金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌等革蘭氏陽性菌。
通過不同方法檢測穎泰三號和其他同類芽孢桿菌產品的抑菌性能，評估不同產品對產氣莢膜梭菌和金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽性菌的抑菌效果，為飼料廠在替代抗生素方面的應用提供參考依據。
試驗目的：
試驗方法：參照藥典方法，分別取0.1mL產氣莢膜梭菌CVCC2027、金黃色葡萄球菌CMCC26003細菌菌液，加入含10mL LB液體培養(yǎng)基的滅菌試管中，再將制備好的3個待測樣品溶液分別按照1%、3%、6%的濃度（0.1mL、0.3mL、0.6mL）加入前述試管中。同時設立空白對照（試管內只加LB液體培養(yǎng)基和細菌菌液）。
37℃培養(yǎng)，24小時后測定各試管菌液OD600nm（用LB培養(yǎng)基調零），記錄、計算各產品不同濃度下的抑菌率。
抑菌率=（A空-A樣）/A空*100%
A樣：樣品組24h OD值。
試驗結果如下：
圖1.2 穎泰三號對2種細菌的抑菌效果
圖1.4 進口枯草芽孢桿菌對2種細菌的抑菌效果
結論：
試驗方法：將3個樣品益生菌活化，于LB培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)16h，之后將各產品發(fā)酵液離心，取其上清液，用無菌水2倍梯度稀釋依次制備成1/2、1/4、1/8、……、1/256的樣品溶液，備用。
將各細菌菌液加入到TSC培養(yǎng)基中，之后倒入放有牛津杯的素瓊脂培養(yǎng)皿中，取出牛津杯，吸取150μL不同濃度的各樣品溶液加入到相應的孔內，同時設立滅菌水為空白對照，并在培養(yǎng)皿上做好標記。
將加過樣的培養(yǎng)皿移入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16h，測量、記錄抑菌圈。
3種產品對不同產氣莢膜梭菌的MIC：
表2.2 穎泰三號和其他芽孢桿菌產品對5種產氣莢膜梭菌的MIC
圖2.2 不同產品對豬產氣莢膜梭菌1的抑菌圈
圖2.3 不同產品對豬產氣莢膜梭菌2的抑菌圈
圖2.4 不同產品對雞產氣莢膜梭菌1的抑菌圈
圖2.5 不同產品對雞產氣莢膜梭菌2的抑菌圈
結論：
注：以上數據均來自農業(yè)農村部飼用抗生素替代技術重點實驗室。
撰稿：成鵬、李洪宇
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